Wstępna ocena podejścia opartego na biosensorze do wykrywania przeciwciał ludzkich przeciwko immunopeptydom pochodzenia ptasiego w pneumopatii nadwrażliwościowej

Zapalenie płuc z nadwrażliwości (HP), a zwłaszcza zapalenie płuc hodowcy ptaków (BFL), pozostaje niedodiagnozowane z powodu braku wiarygodnych, szybkich i swoistych narzędzi diagnostycznych. Obecne metody – oparte na wywiadzie klinicznym, badaniach obrazowych i testach serologicznych – są ograniczone zarówno pod względem dokładności, jak i dostępności. Metody oparte na immunologii, takie jak ELISA czy Ouchterlony Double Diffusion (ODD), powszechnie wykorzystują surowe odchody ptaków jako antygeny, co często prowadzi do niskiej swoistości z powodu reaktywności krzyżowej. W poprzednich badaniach opracowano również testy ELISA z wykorzystaniem białek rekombinowanych (biomarkerów) zidentyfikowanych w odchodach gołębi w celu poprawy swoistości. W naszym poprzednim badaniu, przeprowadzonym we współpracy z Centrum Zaawansowanych Materiałów i Technologii (CEZAMAT) Politechniki Warszawskiej oraz Katedrą Mikrobiologii Instytutu Gruźlicy i Chorób Płuc (Warszawa), zidentyfikowaliśmy dwa potencjalne biomarkery białkowe – IGLL1 i ProE – w odchodach gołębi (na podstawie przeglądu literatury). Zamiast stosować rekombinowane białka, skupiliśmy się na identyfikacji immunogennych epitopów komórek B (peptydów) pochodzących z tych biomarkerów, ponieważ są one bardziej opłacalne, oferują wyższą swoistość i zmniejszają zmienność między partiami. Przewidzieliśmy te epitopy in silico, zsyntetyzowaliśmy odpowiadające im peptydy i przetestowaliśmy ich reaktywność z próbkami pacjentów za pomocą testu ELISA. Jeden peptyd, IgLL1_Seq1, wykazał 100% czułość i 92% swoistość, co wskazuje na jego potencjał jako markera diagnostycznego. Niniejsze badanie ma na celu ocenę wykonalności wykorzystania elektrochemicznych biosensorów do wykrywania przeciwciał przeciwko tym peptydom. Przejście z testu ELISA na metodę opartą na biosensorach może umożliwić stworzenie szybszego, bardziej czułego i swoistego narzędzia diagnostycznego, odpowiedniego do zastosowań w punktach opieki.